TNN buffer recipe

 

Western blot에서 사용하는 lysis buffer를 만들때 필요한 TNN buffer recipe 입니다.

자주 사용하는 버퍼이기 때문에 tris나 NaCl, EDTA는 수용액으로 만들어 놓고 필요할때마나 넣으면 편합니다.

 

TNN buffer (lysis buffer)

50mM Tris-Cl(pH7.4) 

150mM NaCl.             

0.5% NP40.              

1mM EDTA.               

이것은 기본 농도 입니다.                        

 

1.준비단계

 

Tris (mw:121.14) 6.057g + DW 50ml => 1M 용액 만듦.

NaCl (mw:58.44) 14.610g + DW 50ml => 5M 용액 만듦.

EDTA (mw:292.24) 1.169g + DW 20ml => 0.2M 용액 만듦.

0.5% NP40은 그냥 준비.

 

2.TNN buffer 만들기.

1M Tris-Cl은  2.5ml 사용

5M NaCl은 2.5ml 사용

NP40은 250ul(0.5%됨)사용.

0.2M EDTA는 250ul 사용.

나머지는 DW 넣어서 50ml 맞춤.

 

그리고 lysis buffer로 사용할때 Protease inhibitor 넣는거 잊지마세요~